کشت کراتینوسایت های انسانی در محیط کشت عاری از سرم

Authors

سونا زارع

sona zare master student in cellular and molecular biology dept., kurdistan university, sanandaj, iran.دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه علوم زیستی و بیوتکنولوژی، دانشگاه کردستان، سنندج، ایران. طیب قدیمی

tayeb ghadimi surgery dept., faculty of medicine, kurdistan university of medical sciences, sanandaj, iran.گروه جراحی، دانشگاه علوم پزشکی کردستان، سنندج، ایران. محمد علی زارعی

mohammad ali zarei biological sciences and biotechnology dept., faculty of science, kurdistan university, sanandaj, iran.گروه علوم زیستی و بیوتکنولوژی، دانشگاه کردستان، سنندج، ایران فردین فتحی

fardin fathi anatomy and embryology dept., cellular and molecular research center, kurdistan university of medical sciences, sanandaj, iran.گروه علوم تشریح و مرکز تحقیقات علوم سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی کردستان، سنندج، ایران.

abstract

چکیده زمینه و هدف: سلول های کراتینوسایت انسانی ابزار مفیدی جهت انجام مطالعات سلول درمانی به منظور بهبود سوختگی ها و زخم های مزمن محسوب می شوند. همچنین کراتینوسایت ها با کارائی بالا به سلول های پرتوان القائی تبدیل می شوند. در این مطالعه جزئیات مربوط به روش های جداسازی، کشت و تکثیر سلول های کراتینوسایت از نمونه پوستی ختنه گاه انسان، توصیف شده است. روش بررسی: در این مطالعه که از نوع آزمایشگاهی، و مشاهده ای بود. نمونه مربوط به پوست ختنه گاه نوزادانی که به تازگی ختنه شده بودند تحت شرایط استریل به آزمایشگاه منتقل شد. از آنزیم دیسپاز جهت جداسازی اپیدرم از درم و از آنزیم تریپسین برای جداسازی سلول های کراتینوسیت موجود در لایه اپیدرم استفاده شد. سلول ها در ظروف کشت پوشش داده شده با کلاژن نوع i انسانی و محیط کشت اپی لایف عاری از سرم، کشت داده شدند. ارزیابی های مورفولوژیک و ایمونوسیتوشیمی جهت تایید ماهیت سلول های جداسازی شده انجام شد. یافته ها: نتایج ارزیابی های انجام شده نشان داد که سلول های جداسازی شده دارای مورفولوژی تیپیک کراتینوسایت ها بوده و آنتی ژن اختصاصی کراتینوسایت ها ck14 را هم بیان می کنند. هر 4 الی 5 روز یکبار سلول ها به نسبت 1 به 2 پاساژ داده شدند. بعد از پاساژ 10 تکثیر سلول ها به شدت کاهش یافته و از نظر مورفولوژیک ظاهری پهن و نازک پیدا کردند. نتیجه گیری: در این مطالعه نحوه جداسازی و تکثیر کراتینوسایت های انسانی مشتق از نمونه پوستی ختنه گاه انسان در آزمایشگاه بهینه سازی شد. از آنجاییکه بیش از بیست بار سلول ها با موفقیت جداسازی شدند می توان نتیجه گرفت ، روش معرفی شده در این مقاله که نسبت به روش های پیشین همراه با مقداری تعدیل و بصورت جزیی تری توصیف شده است در آزمایشگاه های دیگر نیز تکرار پذیر است. کلید واژه ها: کراتینوسایت های انسانی، نمونه پوست ختنه گاه انسان، سایتوکراتین 14، محیط عاری از سرم وصول مقاله :18/3/92 اصلاحیه نهایی:14/10/92 پذیرش:17/10/92

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

کشت کراتینوسایت‌های انسانی در محیط کشت عاری از سرم

چکیده زمینه و هدف: سلول‌های کراتینوسایت انسانی ابزار مفیدی جهت انجام مطالعات سلول درمانی به منظور بهبود سوختگی‌ها و زخم‌های مزمن محسوب می‌شوند. همچنین کراتینوسایت‌ها با کارائی بالا به سلول‌های پرتوان القائی تبدیل می‌شوند. در این مطالعه جزئیات مربوط به روش‌های جداسازی، کشت و تکثیر سلول‌های کراتینوسایت از نمونه پوستی ختنه‌گاه انسان، توصیف شده است. روش بررسی: در این مطالعه که از نوع آزمایشگاهی، ...

full text

کشت کراتینوسایت های موش صحرایی در محیط کشت بدون سرم به روش کاشت اپیدرم

Background and purpose: To establish a simple method for preparation of pure epidermal cell in serum-free medium, without co culturing with lethally irradiated 3T3 cells. Materials and methods: Â piece of skin biopsy was taken from a rat. Âfter trypsinazation to separate epidermal layer, the epidermis was cut into explants 1×1 mm and were laid at 50 mL on tissue cultured flasks. Then, the ex...

full text

کشت کراتینوسایت های موش صحرایی در محیط کشت بدون سرم به روش کاشت اپیدرم

سابقه و هدف: امروزه برای کمک به ترمیم آسیب های پوستی نظیر سوختگی ها، زخم های مزمن دیابتیک یا زخم های مزمن ناشی از جراحی، از کشت کراتینوسایت ها و پیوند آن ها به محل ضایعه استفاده می شود. در این روش باید پیوستگی لازم برای کشت سلول های اپیدرمال در شرایط آزمایشگاه ایجاد شود. به این منظور در این تحقیق از روش ساده کاشت اپیدرم به همراه محیط کشت بدون سرم که در آن نیازی به فیبروبلاست های 3t3 وجود ندارد،...

full text

بررسی مورفولوژی و ایمونوفنوتیپ سلولهای بنیادی مزانشیمی بعد از تعویض سرم گاوی محیط کشت به سرم انسانی

Background: Mesenchymal Stem Cells (MSCs) are used for cell therapy purposes. Fetal Bovine Serum (FBS) in culture media is essential for growth. As FBS may induce an immunological reaction and transfer pathogenic agents to MSC recipients, this study was designed to evaluate Adipose Tissue Stem Cells (ASCs) in FBS, human serum, switching of FBS to human serum and vice versa by cytology and flow ...

full text

تمایز سلول‌های بنیادی جنینی موشی به رده مگاکاریوسیتی در محیط کشت عاری از لایه تغذیه کننده

  چکید ه   سابقه و هدف   سلول‌های بنیادی جنینی، سلول‌های بالقوه چند ظرفیتی اند که ازتوده سلول داخلی مرحله بلاستوسیت جنینی مشتق می‌شوند. تاکنون تمایز سلول‌های بنیادی جنینی به رده مگاکاریوسیتی، از هم کشتی با سلول‌های استرومایی مغز استخوان بوده است که دارای معایبی چون احتمال انتقال آلودگی از لایه تغذیه کننده به سلول‌های بنیادی وهمچنین ترشح فاکتورهای نامشخص از این لایه در ایجاد تمایز ناخواسته و ایج...

full text

بررسی بیان ژن های فاکتور نوروتروفیک در سلول های بنیادی چربی انسانی کشت شده در محیط های سرم دار و بدون سرم

سابقه و هدف: از آنجا که سرم گاوی در انسان ایمونولوژیک بوده و به­ هنگام پیوند خطر انتقال عفونت را به ­همراه دارد، در این تحقیق سرعت تکثیر، بقاء و بیان ژن ­های نوروتروفینی در سلول­ های بنیادی چربی انسانی کشت داده شده در محیط بدون سرم و سرم­دار با یکدیگر مقایسه شدند. مواد و روش ­ها: در این مطالعه تجربی سلول­ های بنیادی از بافت چربی زیرجلدی ناحیه شکم 15 خانم سزارینی استخراج شده و در محیط کشت -MEMα...

full text

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
مجله دانشگاه علوم پزشکی کردستان

جلد ۱۹، شماره ۲، صفحات ۲۱-۳۰

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023